"Degradación
de contaminantes persistentes:
una aplicación innovadora de la biotecnología forestal."
En esta sección voy a ir incluyendo los documentos, imágenes y demás información que vaya obteniendo durante la beca que estoy realizando en el Departamento de Biotecnología de la E.T.S.I. Montes de Madrid.
Lo primero que aparece es una tabla con
algunos documentos que he usado durante mi beca, empezando por la memoria
que se presentó con la solicitud en Septiembre. En la memoria viene muy bien
explicado qué es lo que estoy haciendo exactamente, por si alguno tenéis
curiosidad y yo no se lo he dejado muy claro. También pondré enlaces a páginas
en donde se habla de temas relacionados con el mundillo éste, por si a alguien
le interesa.
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Memoria del Proyecto de Colaboración. (2 páginas) |
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| Exploitation of plants for the removal of organics in environmental remediation. | A Citizen´s Guide to Phytorremediation. |
| Secondary plant metabolites in phytorremediation and biotransformation. | The Chemistry of PCBs. |
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Web del Departamento de Biotecnología de la
UPM, en donde aparece reflejado el proyecto de investigación en el que estoy incluido. Enlace directo al proyecto pinchando aquí. |
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El Laboratorio de Bioquímica se encuentra en la primera planta del edificio principal de la Escuela de Montes, justo encima de la biblioteca.
Por la puerta de acceso se entra a un pasillo repleto de aparatos entre los que hay tres congeladores de -80ºC, un fitotrón (cámara que simula la temperatura, horas de luz y humedad, para el cultivo de plantas) y varios espectrofotómetros, centrífugas y demás... El pasillo termina en una puerta acristalada que da acceso a los despachos y las mesas de trabajo (fotografía de la derecha).
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En el laboratorio donde están los puestos
de trabajo suelen estar Carmen, Rosa y Cristian, que llevan a cabo experimentos
distintos al mío.
En el mismo proyecto estamos trabajando ahora Irene y yo, dirigidos por Luis,
aunque Irene está realizando su Tesis y yo el Proyecto.
En la foto de la izquierda se ve mi sitio de trabajo al
fondo, al lado de la campana de flujo laminar (donde realizo el repique de los
chopos cultivados "in vitro", en esterilidad).
En la foto de la derecha se ve mi mesa, con las micropipetas
a la derecha y los botes con los compuestos para diversos experimentos y para el
medio de cultivo de los chopos.
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El cultivo de chopo se hace en unos botes
especiales (foto de la izquierda) que permiten el paso de aire pero no el de esporas,
bacterias ni ningún otro
tipo de ser vivo dentro. De este modo se consigue que dentro del bote el único
organismo vivo que haya sea el chopo o chopos que estés cultivando.
Por lo tanto, en el momento del repicado del chopo (se corta
el tallo en trozos y se pone cada uno en
un bote distinto, con medio de cultivo nuevo) es en el que hay que tener
especial cuidado para evitar la entrada de esporas, bacterias u otros organismos
dentro del bote. Este proceso se realiza en la campana de flujo laminar (foto de
la derecha).
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Fases para el cultivo de chopo
in vitro:
Lavado y esterilizado de los botes y las tapas. El
lavado se realiza en un lavavajillas especial que aclara con agua destilada,
para evitar en la medida de lo posible que queden residuos sólidos o
microorganimos. El esterilizado se lleva a cabo en un auto-clave, que es
básicamente una olla a presión que alcanza temperaturas de más de 100º C y
elevadas presiones, lo que garantiza que todos los microorganismos se
destruyen. Para asegurar este proceso, que es clave en el cultivo in
vitro, se esterilizan dos veces los botes.
Preparación del medio de cultivo y volcado en los
botes. El medio de cultivo en el que crecen los chopos es una especie de
gel, un poco más denso que una gelatina, compuesto por glúcidos, hormonas de
crecimiento, vitaminas y otros compuestos (además de agua, claro) que
favorecen el crecimiento de la planta en las mejores condiciones posibles.
El medio se esteriliza en el auto-calve y se vierte en los botes en la
campana de flujo (toda manipulación de los botes que conlleve abrirlos hay
que realizarla en la campana, esto es, el vertido del medio en estado
líquido y el repicado de chopos) cuando aún está caliente y en estado
líquido, para dejarlo solidificar cuando se enfría.
Los botes se dejan unos días en oscuridad y a una temperatura de unos 4º C
para comprobar que no ha habido contaminaciones ya que, si al manipularlos
han entrado bacterias o esporas, en poco días el medio cambia de color y
aparece un micelio como en el pan de molde, debiendo
tirarse el medio de ese bote e iniciar de nuevo en el paso 1 el proceso...
Repicado de los chopos en otros botes. Cuando un
chopo alcanza unas dimensiones suficientemente grandes, llegando a tocar con
la tapa del bote, es el momento de repicarlo, transplantándolo a otro bote.
El proceso, que se realiza de nuevo en la campana de flujo laminar, consiste
en sacar la planta del bote y en cortar el tallo en trozos que contengan al
menos una yema y una hoja. Cada uno de estos trozos se mete en un bote (o
varios en el mismo), pinchándolo en el medio de cultivo.
Al cabo de unas dos semanas los tallos han comenzado a emitir raíces por la
parte inferior y hojas por la yema que había en el tallo, continuando el
crecimiento hasta que llega el momento de volver a repicar.
Condiciones ambientales en el fitotrón. El
fitotrón es una cámara que permite regular la temperatura y la luz en su
interior, pudiendo programarla para que varíen los parámetros cada ciertas
horas. De este modo se consigue que los chopos crezcan en unas condiciones
idóneas de temperatura y horas de luz.
 El Fitotrón. |
 Interior del fitotrón. |
 Botes dentro del fitotrón. |
